发表时间：2014-05-07T14:52:29.933Z 来源：《中外健康文摘》2013年第43期供稿 作者： 蒋永康 张桂华
[导读] TRUST法阳性检出率低于TPPA法，但是这种方法操作简便、成本较低，且灵敏度高，比较适用于大量标本的筛查。蒋永康 张桂华（中国医科大学附一院鞍山医院检验科 辽宁鞍山 114012）
【摘要】目的 应用梅毒甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验（TPPA）两种不同的血清学检测方法，测定血清标本梅毒抗体，比较两种方法的梅毒的检出率，并进行方法学评价。方法 收集中国医大附一院鞍山医院2012年7月到2013年3月门诊梅毒检测的病人标本193例。采用TRUST法和TPPA法检测梅毒血清并比较检测结果。结果 193例来我院检查的可疑梅毒患者中，TPPA法检测出71例阳性，而TRUST法检测这71例梅毒感染患者， 发现65例阳性，6例阴性，阳性率91.5%，两种方法均可排除的有122例。两种方法检出率比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 TRUST灵敏度和特异性均底于TPPA，存在一定假阴性，对早期梅毒的辅助诊断能力差，但检测手段简单，适用于疗效观察、随访和复发的辅助诊断，TPPA法检出率高，可以作为临床检测梅毒螺旋体抗体的特异性方法。
【关键词】 TRUST TPPA 梅毒螺旋体抗体 血清学检测
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）43-0146-02
本实验采用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集实验（TPPA）两种方法进行梅毒螺旋体检测并比较两者之间的灵敏度、特异性为临床提供较为准确的实验诊断依据。 1. 材料与方法 1.1 材料
采集 193例来中国医大附一院鞍山医院就诊的患者血清，经我院性病科确诊者例数为71例，其中潜伏期梅毒11例、Ⅰ期梅毒23例、Ⅱ期梅毒35例、Ⅲ期梅毒2例。 1.2 试剂
TRUST试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品、TPPA试剂为日本东京富士瑞必欧株式会社产品，试剂均在有效期内使用。 1.3方法
TRUST实验和TPPA实验严格按照试剂盒说明书操作。 1.4统计学分析
采用SPSS11.0软件进行统计学分析对实验数据进行正态性检验，正态分布的计量资料以百分率表示，X2检验，P<0.05为差异有统计学意义。 2．结果
2.1 193例病人标本中，用TURST法检测出现了65例阳性（其中4例阳性经TPPA法验证为阴性），128例阴性。另外用TPPA发检测出现71例阳性，122例阴性，结果见表1。统计学分析X2检测0.4087<3.84，P>0.05。所以此两种方法没有显著的差异。 表1 两种血清学方法检测193例标本结果
2.2 71例梅毒患者血清标本用TRUST法检测出现了65例阳性，其中潜伏期梅毒患者8例、I期患者21例、II期梅毒患者35例、III期梅毒患者1例；而用TPPA法对71例梅毒患者血清标本进行检测出71例阳性，其中潜伏期梅毒患者11例、I期梅毒患者23例、II期梅毒患者35例、III期梅毒患者2例。两种方法对于潜伏期和I期梅毒的阳性检出率存在一定的差异，而对于II期梅毒和III期梅毒的检出率基本一致，II期梅毒，TRUST阳性只有一例，而TPPA检出两例阳性，由于标本量不够，可能存在某种偶然性。结果见表2。 表2 71种血清标本两种血清学实验的检测结果
3. 讨论
机体感染梅毒螺旋体后可产生梅毒螺旋体抗体和非特异性类脂质抗体。梅毒螺旋体抗体出现早消失迟，即使经过正规抗梅毒治疗仍可检出，甚至终生检出[1]。梅毒螺旋体侵入机体可产生两种抗体：一种是非梅毒螺旋体特异性抗体，是梅毒螺旋体在破坏时释放的抗原性物
质刺激抗体产生的反应素，检测这种抗体的实验称为初筛实验。如：RPR、TRUST、USR等。一种是梅毒螺旋体特异性抗体，包括IgM、IgG，检测这种抗体的实验称为确诊实验，用于筛查标本阳性的确认，如：TPPA、TP-ELLSA、TPHA。TRUST实验所用的试剂是测非特异性反应素，在梅毒潜伏期Ⅰ期时有可能出现假阴性[2]。
由表2可以看出，11例潜伏期的梅毒患者TRUST检测法只检出了8例，23例I期的梅毒患者则检出21例，这是由于此时的反应素很少，达不到TRUST的检测限，同时由于易受某些传染性疾病，以及自身免疫性疾病等因素干扰，如：类风湿关节炎，高脂血症，非淋菌性尿道炎患者中存在假阳性[3]，无梅毒感染史的正常人群中阳性率达0.1%[4]，因此具有很大局限性单独作为筛查实验。本实验结果中出现4例假阳性，对于假阳性应结合临床排去梅毒感染，对于假阴性应结合临床综合分析，也不能排除螺旋体的感染。而TPPA检测法对于潜伏期和I期梅毒患者则全部检出，TPPA检测血清中梅毒特异性抗体，灵敏度高，特异性好。梅毒螺旋体感染后此抗体在体内在体内持续存在，可终身保留，检测结果不随病情发展和治疗而变化，故TPPA作为梅毒的确诊试验，对I期、II期及潜伏期梅毒敏感性均较高，敏感性均为100%[5]。
而TPPA实验对TRUST实验中出现的生物学假阳性病例能做出鉴别诊断，属特异性诊断，但梅毒患者IgG抗体治愈后相当长的时间内仍然存在较高的阳性率，甚至终生阳性[6]。故TPPA实验阳性不能区分既往接受治疗或者活动性感染者。TPPA以纯化的致病性密螺旋体抗原致惰性的人工明胶颗粒，结果稳定敏感性也更好，可检测IgM和IgG抗体，具有目前公认性的梅毒螺旋体确认方法[7]。对梅毒的早期感染确诊具有重要的意义，但其不适合于对疗效的评估、复发、再度感染的诊断。此方法试剂成本高，耗时较长不适合大量标本的筛查，适合于初筛实验阳性后的确诊实验。
总之TRUST和TPPA两种方法同时检测能够提高梅毒患者的诊断，对不同时期的梅毒诊断具有重要的意义。但是仍然存在不同程度的假阳性和假阴性，在我们进一步的研究中，我们将致力于检测梅毒螺旋体IgG和IgM抗体的检测, 以其进一步提高诊断率。 4．结论
TRUST法阳性检出率低于TPPA法，但是这种方法操作简便、成本较低，且灵敏度高，比较适用于大量标本的筛查。
TPPA法的阳性检出率高于TRUST法，且特异性好。但是耗时较长，且成本较高，不适合大量标本的筛查，适合于初筛实验阳性后的确诊实验。
如果这两种方法同时检测，能够提高梅毒患者的诊断，对于不同时期的梅毒诊断具有重要的意义。 参考文献
[1]Lambert NL,Fisher M,Imrie J,et al. Community based syphhilks screening:feasilility,acceptability,and effectiveness in casefinding[J]. Sex Transm Infect,2005,81（3）:213-216.
[2]朱汉民,沈霞,临床实验诊断[M],上海:上海人民出版社,2004,1194—1197. [3]龙振华,实用梅毒学[M],北京:中国人口出版社,2001,152—186.
[4]Gerber A, Krell S, Morenz J, Recombinant Treponema Pallidum antigens in Syphilis Serology [J], Immunobiology, 2007, 196:535—549.
[5]宫晓红，张连平，等.早期梅毒实验室检测方法的评价[J].实用医技杂志，2007，（6）：709-710.
[6]郑怀竟,邢文革,免疫学检验与临床疾病安全输血[M],北京医科大学中国协和医科大学联合出版社,2007:138—140. [7]陆学东,张银辉,党倩丽,等,梅毒实验室诊断与评价[J],中华检验杂志,2005,28（12）:1262.
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