(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 105646286 A (43)申请公布日 2016.06.08
(21)申请号 201610094139.6(22)申请日 2016.02.19
(71)申请人常州吉恩药业有限公司
地址213000 江苏省常州市新北区玉龙北路
658号(72)发明人王玉琴 詹玉进 张璞
(74)专利代理机构江苏致邦律师事务所 32230
代理人栗仲平(51)Int.Cl.
C07C 271/22(2006.01)C07C 269/04(2006.01)
权利要求书2页 说明书4页 附图1页
(54)发明名称
含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法(57)摘要
含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：用三氟化硼为络合剂，对赖氨酸alpha-氨基和羧基进行保护；加入Boc酸酐对epsilon-氨基进行选择性保护；然后用碱液除去硼络合物；利用Fmoc-OSU（9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯）对alpha-氨基进行保护，得到所需产品。本发明的工艺避免了传统工艺中硫化钠脱铜时产生刺激性有毒气体，解决了安全环保问题；同时解决了因8-羟基喹啉价格高而造成的原料成本偏高的问题。采用本发明的工艺，可以比传统工艺降低成本15%。
C N 1 0 5 6 4 6 2 8 6 ACN 105646286 A
权 利 要 求 书
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1.一种含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：用三氟化硼为络合剂，对赖氨酸alpha-氨基和羧基进行保护；加入Boc酸酐对epsilon-氨基进行选择性保护；然后用碱液除去硼络合物；
利用9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯对alpha-氨基进行保护，得到所需产品。2.根据权利要求1所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，具体操作步骤如下：
⑴.将赖氨酸分散于四氢呋喃中；⑵.冰浴搅拌下加入甲醇钠；⑶.自然升温至室温搅拌1小时；
⑷.加入50%的三氟化硼四氢呋喃溶液；⑸.缓慢升温至50度；
⑹.搅拌5小时至体系澄清；
⑺.加入二碳酸二叔丁酯的四氢呋喃溶液；⑻.液碱控制pH为8左右至反应完全；⑼.加入液碱；
⑽.冰浴搅拌半小时；⑾.减压回收四氢呋喃，大量白色固体析出；⑿.离心得中间体H-Lys(Boc)-OH湿品。
3.根据权利要求1所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，
以上步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:5-1:1；以上步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:0.8-1:1.5；以上步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:0.9-1:2；以上步骤⑺中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:0.9-1:5；以上步骤⑼中，赖氨酸与30%液碱的重量比是：4:1-6:1；所述的液碱采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾。
4.根据权利要求3所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，
以上步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是1:2.05；以上步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是： 1:1.05；以上步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:1.5；以上步骤⑺中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:1.2；以上步骤⑼中，赖氨酸与30%液碱的重量比是：5.5:1；所述的液碱采用氢氧化钠。5.根据权利要求2-4之一所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，增加有以下步骤：
.所得的H-Lys(Boc)-OH 湿品中加水和乙酸乙酯；搅匀后用液碱调节pH至9；.分批投入 9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯至反应完全，反应过程用液碱控制pH 9-
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权 利 要 求 书
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10；
.反应结束后用工业盐酸调pH至3；
.分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层加饱和食盐水洗涤；.无水硫酸钠干燥，抽滤，脱溶；.加入甲叔醚打浆2小时；
.抽滤，固体晾干得HPLC分析产品含量大于99.5%。
6.根据权利要求5所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，
步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:2-1:5；步骤中的液碱，采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾；
步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:0.8-1:1.5；步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:15-1:25。
7.根据权利要求6所述的含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法，其特征在于，
步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:3.42；步骤中的液碱采用氢氧化钾；
步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是： 1:1.1；步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是： 1:18。
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说 明 书
含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸的制备方法
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技术领域
[0001]本发明涉及多肽衍生物的合成领域，具体涉及一种含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸（Fmoc-Lys(Boc)-OH）的合成工艺。背景技术
[0002]赖氨酸是最常见的氨基酸之一，侧链含有一个氨基，因此是一种碱性氨基酸。侧链氨基具有较强的反应活性，因此在多肽合成中需要进行保护。Fmoc-L-Lys(Boc)-OH是一种常用的双保护赖氨酸，侧链氨基保护基则常用Boc。
[0003]该产品传统的制备工艺是利用 Cu+2或 9-BBN 为络合试剂对赖氨酸alpha-氨基和羧基进行保护，然后加入Boc酸酐对epsilon-氨基进行选择性保护，最后用硫化钠或者8-羟基喹啉等脱铜试剂除去铜或用三氟过氧乙酸等氧化剂除去 9-BBN，再利用Fmoc-OSU对alpha-氨基进行保护，得到所需产品。传统工艺脱铜试剂硫化钠或者8-羟基喹啉，硫化钠脱铜时会产生刺激性有毒气体，给安全环保造成较大压力。而8-羟基喹啉价格高，提高了原料成本。
发明内容
[0004]为了克服现有技术的上述技术缺点，本发明的目的是提供一种含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸（Fmoc-Lys(Boc)-OH）的新型合成工艺。本发明的工艺将避免硫化钠脱铜时产生刺激性有毒气体，解决安全环保问题；同时解决因8-羟基喹啉价格高而造成的原料成本偏高的问题。
[0005]完成上述发明任务的技术方案是，一种含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸（Fmoc-Lys(Boc)-OH）的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
用三氟化硼为络合剂，对赖氨酸alpha-氨基和羧基进行保护；加入Boc酸酐对epsilon-氨基进行选择性保护；然后用碱液除去硼络合物；利用Fmoc-OSU（ 9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯）对alpha-氨基进行保护，得到所需产品。
[0006]更具体和更优化地说，本发明的合成方法是：
⑴.将赖氨酸分散于四氢呋喃中；⑵.冰浴搅拌下加入甲醇钠；⑶.自然升温至室温搅拌1小时；
⑷.加入50%的三氟化硼四氢呋喃溶液；⑸.缓慢升温至50度；
⑹.搅拌5小时至体系澄清；
⑺.加入二碳酸二叔丁酯的四氢呋喃溶液；⑻.30%液碱控制pH为8左右至反应完全;
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说 明 书
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⑼.加入液碱；
⑽.冰浴搅拌半小时；⑾.减压回收四氢呋喃，大量白色固体析出；⑿.离心得中间体H-Lys(Boc)-OH湿品。[0007]以上步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:5-1:1；最佳比例是1:2.05
以上步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:0.8-1:1.5；最佳比例是1:1.05以上步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:0.9-1:2；最佳比例是1:1.5以上步骤⑺中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:0.9-1:5；最佳比例是1:1.2以上步骤⑼中，赖氨酸与30%液碱的重量比是：4:1-6:1；最佳比例是5.5:1；所述的液碱可以采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾，优先氢氧化钠。[0008]进一步优化，可以增加以下步骤：
.所得的H-Lys(Boc)-OH 湿品中加水和乙酸乙酯；搅匀后用液碱调节pH至9；.分批投入Fmoc-osu（ 9-芴甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯）至反应完全，反应过程用液
碱控制pH 9-10；
.反应结束后用工业盐酸调pH至3；
.分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层加饱和食盐水洗涤；.无水硫酸钠干燥，抽滤，脱溶；.加入甲叔醚打浆2小时；
.抽滤，固体晾干得HPLC分析产品含量大于99.5%。
[0009]
以上步骤中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:2-1:5；最佳比
例是1:3.42；
以上步骤以上步骤比例是1:1.1；
以上步骤
中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:15-1:25；最佳
比例是1:18。
[0010]本发明的工艺避免了传统工艺中硫化钠脱铜时产生刺激性有毒气体，解决了安全环保问题；同时解决了因8-羟基喹啉价格高而造成的原料成本偏高的问题。采用本发明的工艺，可以比传统工艺降低成本15%。附图说明
[0011]图1是本发明的合成工艺图。[0012]具体实施办法
下面结合实例对本发明作进一步的说明，其目的仅在于更好的理解本发明的内容而非限制本发明的保护内容。[0013]实施例1，含Boc侧链氨基保护的双保护赖氨酸（Fmoc-Lys(Boc)-OH）的合成工艺。参照图1。
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中的液碱，可以采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾，优先碳酸钾。；中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:0.8-1:1.5；最佳
CN 105646286 A[0014]
说 明 书
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⑴.将146克赖氨酸分散于300毫升四氢呋喃中；⑵.冰浴搅拌下加入甲醇钠57克；
⑶.自然升温至室温搅拌1小时。⑷.加入50%的三氟化硼四氢呋喃溶液203克；⑸.缓慢升温至50度；⑹.搅拌5小时至体系澄清。⑺.加入二碳酸二叔丁酯262克的四氢呋喃溶液；⑻.液碱控制pH为8左右至反应完全。⑼.加入液碱20毫升;⑽.冰浴搅拌半小时。⑾.减压回收四氢呋喃，大量白色固体析出;⑿.离心得中间体H-Lys(Boc)-OH 湿品。[0015]实施例2，
.将实施例1中所得H-Lys(Boc)-OH 湿品中加水800克，乙酸乙酯800克，搅匀后用液
碱调节pH至9。.分批投入Fmoc-osu 约350克至反应完全，反应过程用液碱控制pH9-10。.反应结束后用工业盐酸调pH至3；.分出乙酸乙酯层，乙酸乙酯层加饱和食盐水洗涤；.无水硫酸钠干燥，抽滤，脱溶；.加入4.3KG甲叔醚打浆2小时，抽滤，固体晾干得202克。HPLC分析产品含量大于99.5%。.抽滤，固体晾干得HPLC分析产品含量大于99.5%。
[0016]
实施例3，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:5；
赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:0.8；步骤⑵中，
步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:0.9；
赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:0.9；步骤⑺中，
步骤⑼中，赖氨酸与30%液碱的重量比是：4:1；所述的液碱采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾。[0017]实施例4，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：
步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是：1:1；步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是：1:1.5；步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:2；步骤⑺中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:5；实施例5，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：步骤⑴中，赖氨酸与四氢呋喃的重量-体积比是1:2.05；步骤⑵中，赖氨酸与甲醇钠的摩尔比是： 1:1.05；步骤⑷中，赖氨酸与三氟化硼的摩尔比是：1:1.5；步骤⑺中，赖氨酸与二碳酸二叔丁酯的摩尔比是：1:1.2；步骤⑼中，赖氨酸与30%液碱的重量比是：5.5:1；所述的液碱采用氢氧化钠。[0018]实施例6，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：
步骤步骤步骤步骤
[0019]
中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:2；中的液碱，采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾；中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:0.8；中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:15。中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:5；中的液碱，采用氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾；
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实施例7，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：
步骤步骤
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说 明 书
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步骤步骤
[0020]
中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:1.5；中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:25。中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与乙酸乙酯的重量比是：1:3.42；中的液碱采用氢氧化钾；
中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与Fmoc-osu的摩尔比是：1:1.1；中，H-Lys(Boc)-OH折干重量与加入甲叔醚的重量比是：1:18。
实施例8，与实施例1、2基本相同，但有以下改变：
步骤步骤步骤步骤
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说 明 书 附 图
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