广西农业科学２０１０，４１（８）：８３１－８３４ Ｇｕａｎｇｘｉ Ａｇｒｌｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ・ ８３１ ・ 促性腺激素释放激素在不同品种母牛 垂体中的免疫组化定位 凌泽继 ，李瑞明 ，秦津 ，谢莹雪 ，宋小白 ，杨柄壮 ，许典新 ５３０００１） （１广西大学动物科学技术学院，南宁５３０００５；２广西水牛研究所，南宁５３０００１；３广西畜禽品种改良站，南宁摘要：为了掌握促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）及其受体在不同品种母牛垂体中的变化规律，采用免疫组化ｓＰ染色 法分别对广西沼泽型水牛、摩拉杂交水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛垂体中ＧｎＲＨ的分布表达进行对比研究。结果表 明，不同品种母牛垂体中均发现有呈棕黄色或黄褐色的ＧｎＲＨ阳性物质存在，经Ｉｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ６．０软件统计发现，摩 拉杂交母水牛的ＧｎＲＨ免疫阳性细胞较其他３个品种的大（Ｐ＜０．０５），而平均光密度值介于荷斯坦母奶牛和广西本地母 黄牛之间（Ｐ＞０．０５）。在神经垂体中仅发现ＧｎＲＨ免疫阳性纤维，而未发现ＧｎＲＨ免疫阳性细胞；在腺垂体远侧部的细 胞均呈ＧｎＲＨ免疫反应阳性，阳性物质主要分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞胞质内。说明ＧｎＲＨ对腺垂体激 素分泌的调节可能是直接通过神经调节，而神经垂体可能只是ＧｎＲＨ调节过程的通路。 关键词：促性腺激素释放激素；母牛；垂体；免疫组化 中图分类号：￥８５２．１６＋５ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—８１６１（２０１０）０８—０８３１－０４ Ｉｍｍｕｎｏ－ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｇ０ｎａｄ０ｔｒ０ｐｉｎ—ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｉｎ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｇｌａｎｄ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ＣＯＷ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ＬＩＮＧ Ｚｅ＿ｊｉ ，ＬＩ Ｒｕｉ－ｍｉｎｇ ，ＱＩＮ Ｊｉｎ ，ＸＩＥ Ｙｉｎｇ－ｘｕｅ ，ＳＯＮＧ Ｘｉａｏ—ｂａｉ ， ＹＡＮＧ Ｂｉｎｇ－ｚｈｕａｎｇ 。ＸＵ Ｄｉａｎ－ｘｉｎ （１ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００５，Ｃｈｉｎａ；２ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｂｕｆｆａｌｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００１，Ｃｈｉｎａ；３ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ ａｎｄ Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｖａｒｉｅｔｙ Ｉｍｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｔｉｏｎ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３０００１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ （ＧｎＲＨ）ｉｎ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｇｌａｎｄ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＣＯＷ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ．Ｔｈｅ ｄｉｓｔｉｒｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＧｎＲＨ ｉｎ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｇｌａｎｄ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｉｎ Ｇｕａｎｇｘｉ ｎａｔｉｖｅ ｓｗａｍｐ ｆｅｍａｌｅ ｂｕｆｆａｌｏ，Ｍｕｒｒａｈ ｈｙｂｒｉｄ ｂｕｆｆａｌｏ，Ｈｏｌｓｔｅｉｎ ＣＯＷ ａｎｄ Ｇｕａｎｇｘｉ ｎａｔｉｖｅ ｆｅｍａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ ｃａｔｔｌｅ ｕｓｉｎｇ ｉｍｍｕｎｏ－ ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｃｌａｙｂａｎｋ ｏｒ ｆｕｌｖｏｕｓ ＧｎＲＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｆ０ｕｎｄ ｉｎ ｂｏｖｉｎｅ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｇｌａｎｄ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ＣＯＷ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＧｎＲＨ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｍｕｒｒａｈ ｈｙｂｒｉｄ ｂｕｆｆａｌｏ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｌａｒｇｅｒ ｔｈｅｒｅ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｏｔｈｅｒ ｔｈｒｅｅ ＣＯＷ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｏｐｔｉｃａｌ ｄｅｎｓｉｔｙ ｖａｌｕｅｓ ｗｅｒｅ ｆ０ｕｎｄ ｓｉｍｉｌａｒ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｈｏｌｓｔｅｉｎ ＣＯＷ ａｎｄ Ｇｕａｎｇｘｉ ｎａｔｉｖｅ ｆｅｍａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ ｃａｔｔｌｅ ｆＰ＞０．ｏ５）．Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｏｎｌｙ ｅｘｉｓｔｉｎｇ ｉｍｍｕｎｅ ＧｎＲＨ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｉｂｅｒｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ，ｂｕｔ ｗｉｔｈｏｕｔ ＧｎＲＨ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐａｒｓ ｄｉｓｔｌｉｓ ｈｙｐｏｐｈｙｓｅｏｓ ａｓｈｏｗｅｄ ＧｎＲＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ．ａｎｄ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｍａｉｎｌｙ ｆ０ｕｎｄ ｉｎ ｃｙｔｏｐｌａｓｍ ｏｆ ｃｈｒｏｍｏｐｈｏｂｅ ａｎｄ ｃｈｒｏ— ｍｏｐｈｉｌｉｃ ｃｅｌ１．Ｔｈｅｓｅ ｒｅｓｕｈｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｏｆ ｐｉｔｕｉｔａｒｙ ｈｏｒｍｏｎｅ ｄｉｒｅｃｔｌｙ ｄｅｐｅｎｄｓ ｏｎ ｎｅｕｒｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＧｎＲＨ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｍａｙ ｈｅｌｐ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ＧｎＲＨ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ＧｎＲＨ；ＣＯＷ；ｐｉｔｕｉｔａｒｙ；ｉｍｍｕｎｏ—ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ 促性腺激素释放激素（Ｇｏｎａｄｏｔｒｏｐｉｎ—ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ。ＧｎＲＨ）是动物生殖过程中最重要的激素之 一为腺垂体和神经垂体两部分，腺垂体可分泌多种激 素以调节动物生长、发育和繁殖等一系列生理活 动，还能调节新陈代谢；切除垂体后机体性腺萎缩， 从而丧失生殖能力，附属生殖器及乳腺也随之萎 缩。ＧｎＲＨ下丘脑神经内分泌细胞分泌．经垂体门 ，是一种由下丘脑神经内分泌细胞合成的肽激 素，以脉冲形式分泌，通过下丘脑一垂体一腺轴在 哺乳类动物的繁殖过程中起着重要作用…。垂体分 收稿日期：２０１０—０６—２１ 基金项目：广西自然科学基金项目（桂科￣０９９１０４２，桂科自０８３２０４３，桂科￣０６４００１５）；广西教育厅基金项目（桂教科研２００７０９ＬＸ０７５） 作者简介：凌泽继（１９５２－），男，广西桂平人，高级畜牧师，主要从事动物繁殖技术研究及推广工作。 为通信作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｘｂａｉ２００５＠１６３ ・８３２・ 产西瓠皿祷聿 脉系统进人垂体后，与垂体中促性腺细胞膜上的受 体作用，但有关ＧｎＲＨ在生殖中的具体作用机制尚 未清楚。为此，本研究采用免疫组化ＳＰ染色法对４种 后ＰＢＳ漂洗５ ｍｉｎｘ３次；每张切片滴一滴一抗．３７℃ 温箱下孵育１ ｈ，ＰＢＳ漂洗５ ｍｉｎｘ３次：然后每张切片 滴一滴二抗。３７℃温箱下孵育３０ ａｉｒｎ．ＰＢＳ漂洗５ ｍｉｎｘ 不同品种母牛垂体中ＧｎＲＨ及其受体进行研究，旨 ３次；除去ＰＢＳ后每张滴一滴显色￣ＩＪＤＡＢ—Ｈ２０ ，在显 微镜下观察３０～６０ Ｓ；自来水充分冲洗，复染，脱水， 透明，封片。以０．０１ ｍｏＬ／Ｌ ＰＢＳ或以正常兔血清代替 一在掌握ＧｎＲＨ及其受体在不同品种母牛垂体中的变 化规律，为研究ＧｎＲＨ在垂体中的作用机理及地方 品种牛改良提供理论依据 抗进行孵育作为空白对照，以验证试验结果的可 １材料与方法 １．１试验动物 供试健康成年雌性广西沼泽型水牛、摩拉杂交 水牛、荷斯坦奶牛、广西本地黄牛各３头，分别购自 广西南宁市肉联厂和广西农垦国有金光农场．体重 ３５０－４５０ ｋｇ。 １．２主要试剂与仪器 一抗为兔抗ＧｎＲＨ多克隆抗体（工作浓度１：２００）， 二抗为即用型广谱Ｓｕｐｅｒ ＰｉｃｔｕｒｅＭ—ＨＲＰ￣．抗，其他 试剂均为国产分析纯：仪器设备主要有包埋机 （４５９０型）、病理组织切片机、Ｏｌｙｍｐｕｓ Ｖａｎｏｘ显微镜 照相系统、ｌｉｎａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ６．０图像分析软件、孵育 盒、不锈钢高压锅等。 １．３取材与固定 将试验动物保定后，切断颈动脉放血致死．迅 速取下头部．打开颅腔，从蝶骨体的垂体窝中取出 垂体，纵向平均分为两部分，将其放人固定液（４％ 多聚甲醛＋０．１ ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲液）中固定１２—２４ ｈ。 １．４免疫组化ＳＰ染色法染色 石蜡切片经常规脱蜡至水洗［２］．０．Ｏ１ ｍｏｌ／Ｌ ＰＢＳ 漂洗５ ｍｉｎｘ３次；高压加热抗原修复后ＰＢＳ漂洗５ ｍｉｎｘ３次：置于３ ｍＬ／ｇ甲醇一双氧水，室温孵育１５ ａｒｉｎ 图１ 荷斯坦母牛腺垂体远侧部ＧｎＲＨ阳性产＠／（ｘ４００倍１ Ｆｉｇ．１ ＧｎＲＩｔ ｉｍｍｕｎｏ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｅｎｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｐａｒｓ ｄｉｓｔａｌｉｓ ｏｆ Ｈｏｌｓｔｅｉｎ ＣＯＷ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） 靠性和特异性。 １．５图像采集及统计分析 将制得的切片置于ＬＥＩＣＱＷＩＮ病理图像仪下拍 照，图像放大４００倍。不同品种母牛垂体的不同部位 分别选取３张切片．根据Ｋｒａａｎ等 的方法，测量其 ＧｎＲＨ阳性细胞大小（Ｓｉｚｅ）、平均光密度值（Ｍｅａｎ ｄｅｎｓｉｔｙ）、ＧｎＲＨ阳性纤维密度（Ｎｅｒｖｅｒ ｆｉｂｅｒ ｄｅｎｓｉｔｙ）， 试验数据以ＳＰＳＳ １６．０进行统计分析 ２结果与分析 ２．１免疫组化染色结果 ２．１．１ 腺垂体 免疫组织化学染色结果显示，不 同品种母牛腺垂体均呈ＧｎＲＨ免疫反应阳性，主要 是在腺垂体边缘区内存在大量的ＧｎＲＨ免疫反应阳 性细胞 ＧｎＲＨ阳性反应物质位于细胞胞质内．呈深 浅不等的黄褐色或棕黄色；细胞核不着色（图ｌ￣４）， 阳性细胞呈椭圆形、三角形或不规则形等，阴性对 照组不着色呈阴性（图５），说明此试验结果特异性 强，结果可靠。 ２．１．２神经垂体 经免疫组织化学染色显示，不 同品种母牛神经垂体上均发现有染色强度不等的 ＧｎＲＨ免疫反应阳性纤维，但未见有ＧｎＲＨ免疫阳性 细胞（图６）。 图２广西本地母黄牛腺垂体ＧｎＲＨ阳性产物（ｘ４００倍１ Ｆｉｇ．２ ＧｎＲＨ ｉｍｍｕｎｏ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｅｎｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ ｎａｔｉｖｅ ｆｅｍａｌｅ ｙｅｌｌｏｗ ｃａｔｔｌｅ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） 凌泽继等：促性腺激素释放激素在不同品种母牛垂体中的免疫组化定位 ・８３３・ 图３广西沼泽型母水牛腺垂体ＧｎＲＨ阳性产物（ｘ４００倍） Ｆｉｇ．３ ＧｎＲＨ ｉｍｍｕｎｏ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｅｎｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ 图４摩拉杂交母水牛腺垂体ＧｎＲＨ阳性产￣（ｘ４００倍） Ｆｉｇ．４ ＧｎＲＨ ｉｍｍｕｎｏ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｄｅｎｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ ｎａｔｉｖｅ ｓｗａｍｐ ｆｅｍａｌｅ ｂｕｆｆａｌｏ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） ｏｆｈｙｂｒｉｄ ｆｅｍａｌｅ Ｍｕｒｒａｈ ｂｕｆｆａｌｏ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） 图５ ＧｎＲＨ在脑垂体免疫组化的阴性对照（ｘ４００倍） Ｆｉｇ．５ Ｔｈｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆＧｎＲＨ ｉｎ ａｄｅｎｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ 图６荷斯坦母牛神经垂体ＧｎＲＨ阳性纤维（ｘ４００倍） Ｆｉｇ．６ ＧｎＲＨ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｉｂｅｒ ｉｎ ｎｅｕｒｏｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｏｆ Ｈｏｌｓｔｅｉｎ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） ＣＯＷ（ｘ４００ ｔｉｍｅｓ） ２．２ ＧｎＲＨ在不同品种母牛垂体中的分布情况 从表１可知，不同品种母牛腺垂体中ＧｎＲＨ阳性 细胞大小不一，其中摩拉杂交母水牛的显著高于其 他３个品种（Ｐ＜０．０５）。在平均光密度方面，摩拉杂交 母水牛的平均光密度值介于荷斯坦母奶牛与广西 本地母黄牛之间，差异不显著（Ｐ＞０．０５），但荷斯坦 母奶牛和广西本地母黄牛之间差异显著（Ｐ＜０．０５）。 在神经垂体中未发现ＧｎＲＨ免疫阳性细胞，但 表１ ＧｎＲＨ在不同品种母牛垂体中的分布情况 发现ＧｎＲＨ免疫阳性纤维，在荷斯坦奶牛神经垂体 中ＧｎＲＨ免疫阳性纤维较其他３个品种多。腺垂体远 侧部细胞均呈ＧｎＲＨ免疫反应阳性．阳性物质主要 分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞胞质内， 为棕褐色或棕黄色。说明ＧｎＲＨ对腺垂体激素分 泌的调节可能是直接通过神经调节，而神经垂体 可能只是ＧｎＲＨ调节过程的通路。 Ｔａｂｌｅ １ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＧｎＲＨ ｉｍｍｕｎｏ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｈｙｐｏｐｈｙｓｉｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ＣＯＷＳ 注：不同小写字母表示差异显著（１９＜０．０５）；“＋”表示阳性纤维少，“＋＋”表示阳性纤维较少，“＋＋＋”表示阳性纤维较多，“＋＋十＋”表示阳性纤维多。 Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｓｍａｌｌ ａｌｐｈａｂｅｔｓ ｉｎ ｓａｍｅ ｃｏｌｕｍｎ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ ５％ｌｅｖｅ１．“＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ ｔｈｅ ｌｅａｓｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｆｂｅｒ．“＋＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ Ｊｅｓｓ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｂｅｒ．“＋＋＋”ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｆｓ ｍｏｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｉｂｅｒ ａｎｄ“＋＋＋＋”ｆｏｒ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｆｉｂｅｒ． ・８３４・ 广西农业科学 ３结论与讨论 本研究结果表明，在不同品种母牛腺垂体中分 布有不等的ＧｎＲＨ免疫阳性物质．通过Ｉｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ６．０软件数据统计发现．摩拉杂交母水牛的 ＧｎＲＨ免疫阳性细胞较其他３个品种大（Ｐ＜０．０５），而 平均光密度值介于荷斯坦母奶牛和广西本地母黄 牛之间（Ｐ＞０．０５）。ＧｎＲＨ免疫阳性细胞大小、平均光 密度值不同，提示ＧｎＲＨ与不同品种、不同生理期的 机体内分泌环境有关。在神经垂体中仅发现ＧｎＲＨ 免疫阳性纤维，而未发现ＧｎＲＨ免疫阳性细胞；在腺 垂体远侧部细胞均呈ＧｎＲＨ免疫反应阳性，阳性物 质主要分布在腺垂体远侧部嫌色细胞和嗜色细胞 胞质，则说明ＧｎＲＨ对腺垂体激素分泌的调节可能 是直接通过神经调节，而神经垂体可能只是ＧｎＲＨ 调节过程的通路。 Ｍｏｏｒｅ等［ ］首次提出下丘脑一垂体一性腺轴的 功能，认为从青春期开始至绝经前机体卵巢发生的 变化（包括排卵期和动情期）在形态、功能上呈现的 周期性，可以解释为卵巢和脑垂体腺相互作用和反 作用的结果［５］。ＧｎＲＨ￣够促进促性腺激素ＦＳＨ、ＬＨ 的释放『６］，与性腺发育、性行为的产生有密切关系。 宋天保等［ ］研究了ＧｎＲＨ前体分子中的ＧｎＲＨ相关 肽在大鼠垂体的分布情况，并在垂体前叶定位了 ＧｎＲＨ。且发现ＧｎＲＨ相关肽存在于培养的大鼠垂体 前叶垂体促性腺激素细胞中Ｅ８ ３。本研究在４个品种 母牛腺垂体中发现有ＧｎＲＨ免疫阳性产物存在，可 能来源于下丘脑。现已证实，ＧｎＲＨ是由下丘脑的小 细胞神经内分泌神经元合成。而下丘脑对腺垂体的 调节主要是由下丘脑内各种调节腺垂体活动的因 子神经元，在正中隆起处释放各种因子，经垂体门 静脉运至腺垂体而起调节作用［９］。ＧｎＲＨ是由下丘 脑小细胞神经内分泌神经元分泌后经垂体门脉系 统到达垂体前叶，作用于垂体前叶靶细胞膜上的 ＧｎＲＨ受体，从而发生一系列生理反应。本研究利用 免疫组织化学方法在腺垂体中未发现ＧｎＲＨ免疫阳 性纤维，仅发现有一些带突起的ＧｎＲＨ免疫阳性细 胞．说明ＧｎＲＨ可能通过旁分泌的作用与邻近细胞 来影响腺垂体其他激素的分泌。 神经垂体虽然不含腺体细胞、不能合成激素， 但在下丘脑视上核、室旁核神经元的核蛋白体上产 生激素原，通过裂解形成神经垂体激素。而且神经 垂体能够合成神经垂体激素运载蛋白，激素原与此 蛋白结合后形成复合物而贮存于神经垂体中，在适 宜的刺激作用下，视上核或室旁核发生兴奋，神经 冲动将沿着下丘脑一垂体束传导至神经垂体中的 神经末梢，使其发生去极化，导致Ｃａ 内流进入神经 末梢内，促进分泌囊泡经出泡作用而将神经垂体激 素与其运载蛋白一并释放进入血液循环［１０，ｔ１］。本研 究利用免疫组化ＳＰ法染色．并未发现有ＧｎＲＨ免疫 反应阳性细胞．但发现有染色强度不等的ＧｎＲＨ免 疫反应阳性纤维，进一步证实了神经垂体是下丘 脑一垂体系统分泌活动的通路。 参考文献： ［１］ Ｎｅｉｌｌ Ｊ Ｄ．Ｋｎｏｂｉｌ ａｎｄ Ｎｅｉｌｌ Ｓ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ 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