白术水提物抑瘤作用及其机制研究

第３（】卷第ｌ期　山东中医药大学学报　Ｖ０Ｉ．３Ｏ．Ｎｏ．１　２００６年１月　ＪＩ：）ＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＳＨＡＮＤＯＮＧ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ　ＯＦ　ＴＯＭ　｜ａｎ．２ｏｏ６　白术水提物抑瘤作用及其机制研究　朱庆均。郑广娟，张丹　（山东ｅｅ医药大学，山东济南２５００１４）　［摘要］目的：研究白术水提物的抑瘤作用，并从调节免疫功能角度探讨其抑瘤机制。方法：以Ｓ１８ｏ荷瘤小鼠为　研究对象，给予不同剂量的白术水提物１０　ｄ，称取瘤重，计算胸腺指数、脾指数，同时利用放射免疫测定法检测血浆　肿瘤坏死因子ａ（ＴＮＦ－ｄ）、白介素一２（ＩＬ一２）的含量。结果：白术各剂量组和模型组瘤重及胸腺指数有显著性差异（Ｐ　＜０．０１或Ｐ＜０．０５），白术中剂量组对ＴＮＦ－ａ和ＩＬＩ２均有显著性影响（Ｐ＜０．叭或Ｐ＜０．０５）。结论：白术可以调　节Ｓｌ８０荷瘤小鼠免疫功能，抑制肿瘤生长，并呈现出一定的剂量效应关系。　［关键词］白术水提物；Ｓｌ８０肉瘤；肿瘤坏死因子ａ；白介索一２　［中图分类号］Ｒ２８２．７１０．５　［文献标识码】Ａ‘　［文章编号］１００７．６５９ｘ（２ｏｏ６）Ｏ１—００６９—０３　￣ｔｕｄｙ　ｏｎ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ　ＺＨＵ　Ｑｉｎｇ—ｊｕｎ，ＺＨＥＮＧ　Ｇｕａｎｇ－ｊｕａｎ，ＺＨＡＮＧ　Ｄａｎ（Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ＴＣＭ，Ｊｉｎａｎ　２５００１４，Ｃｈｉｎａ）　ｌ　Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｏ—ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｂｅａｒｉｎｇ　Ｓａｒｃｏｍａｌ８０　ｗｅｒｅ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　ｏｒａｌｌｙ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｏｓｅｓ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｏｚｍｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｆｏｒ　１　０　ｄａｙｓ．Ｔｈｅｎ　ｔｈｅ　ｔｈｙｍｕｓ　ｉｎ．　ｄｅｘ。ｓｐｌｅｅｎ　ｉｎｄｅｘ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔａｉｎｓ　ｏｆ　ＩＬ一２　ａｎｄ　ＴＮＦ．ａ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｒａｄｉｏ　ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ａｎｄ　ｔｈｙｍｕｓ　ｉｎｄｅｘ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ．　Ｉ＇ｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａ—　ｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｏｚｍｅ　ｃｏｕｌｄ　ａｌｓｏ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＩＬ一２　ａｎｄ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ＴＮＦ—ａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｂｅａｒｉｎｇ￥１８ｏ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｏｚｍｅ　ｃｏｕｌｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｉｍ—　ｍｕｎｏｌｏｇｉｃ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｈｉｂｉｔ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　ｔｕｍｏｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｉｃｅ　ｂｅａｒｉｎｇ　Ｓｔｓｏ，ａｎｄ　ｔｈｉｓ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｍａｙ　ｂｅ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｄｏｓｅ．　．　［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｆ　ｌａｒｇｅｈｅａｄ　ａｔｒａｃｔｙｌｏｄｅｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ；ｓａｒｃｏｍａ　１８０；ＴＮＦ－ａ；ＩＬ一２　白术为治疗肿瘤常用中药，可用治胃癌、食管　１．１材料　癌、肝癌等消化系统肿瘤，对肺癌亦有疗效，临床常　１．１．１　实验材料　昆明系小鼠，雌雄各半，体重　用于复方中治疗肿瘤…。实验研究也证实白术具　ｌ８～２２　ｇ，１０周龄，山东大学西校区实验动物中心　有抑制肿瘤增殖作用＿２，　。但目前对白术抗肿瘤增　提供，清洁级。实验瘤种，ＳＩ８（）肉瘤，腹水型，山东省　殖的机制还了解不多，我们从调节免疫功能角度研　医学科学院肿瘤室提供。中药白术购于本校门诊　究了白术抗肿瘤的作用机制，现将研究结果报告如　部。注射用环磷酰胺，上海华联制药有限公司生产，　下　批号：０１２０３４。ＴＮＦ—ａ放射免疫试剂盒、ＩＬ．２放射　免疫试剂盒购于北京东亚放射免疫研究所。　１材料与方法　１．１．２白术水煎液制备　取中药白术饮片置煎煮　容器中，加入相当于药材量５倍的冷水浸泡ｌ　ｈ，煮　沸３０　ｍｉｎ，过滤；药渣加３倍量水继续煎煮，煮沸　［收稿日期］２００５．０２．３０　［基金项目］山东省中医管理局“十五”攻关课题（编号２００１．　２０　ｍｉｎ，过滤；合并两次滤液，于６０℃水浴中浓缩为　０８）　相当于原生药材１　ｇ／ｍｌ的药液，冷却装入灭菌药　６９　维普资讯 http://www.cqvip.com

山东中医药大学学报　第３０卷第１期　瓶，置４℃冰箱保存备用，用时按要求稀释。　１．２实验方法　术各组分别按照０．２　ｍｌ／１０　ｇ体重给予不同浓度的　白术煎剂，灌胃给药１０　ｄ。　１．２．３检测指标　在动物荷瘤第１１天，称体重，　０．２％戊巴比妥钠麻醉后下腔静脉取血，１０％ＥＤ一　１．２．１　Ｓ嘞荷瘤小鼠模型无菌条件下操作，取传　代第７天的Ｓｌ８０肉瘤小鼠腹水，生理盐水稀释，制成　２×１００／ｍｌ的细胞悬液。每只小鼠右腋部皮下注射　瘤细胞悬液０．２　ｍｌ，制成局灶性肿瘤模型。　ＦＡＮａ２抗凝。１　５００　ｒ／ｒａｉｎ离心取血浆，按放免试剂　盒说明操作、检测。颈椎脱臼处死，取瘤体、胸腺、脾　脏，称重，计算胸腺指数、脾指数。脾指数＝脾脏重　１．２．２实验动物分组接种２４　ｈ后，随机分组，每　组２０只，Ｉ组为模型组，给予生理盐水灌胃，持续　１０　ｄ；１１组为环磷酰胺（ＣＴＸ）阳性对照组，于实验第　量（ｍｇ）／ｆ本重（ｇ），胸腺指数＝胸腺重量（ｍｇ）／￣重　（ｇ）。　３、５、７天腹腔注射ＣＴＸ（剂量１００　ｍｇ／ｋｇ体重）；Ｉｌｉ　组为白术小剂量组（给药浓度为生药０．２５　ｇ／ｍ１），Ⅳ　组为白术中剂量组（给药浓度为生药０．５　ｇ／ｍ１）；Ｖ　组为白术大剂量组（给药浓度为生药１．０　ｇ／ｍ１）。白　２结果　２．１对荷瘤小鼠瘤重、胸腺指数、脾指数的影响　见表ｌ。　表１对荷瘤小鼠瘤重、胸腺指数、脾指数的影响（　±　）　与模型组比较＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１　３讨论　本实验对白术抑制肿瘤生长及免疫学机制进行　量组作用显著，说明白术水提物可改善荷瘤小鼠免　疫器官状况，对因荷瘤而损伤的免疫系统功能有较　好的保护和促进恢复作用，并呈现出一定的剂量效　应关系。　了探讨。通过观察不同浓度白术水提物对Ｓｌ舳肉瘤　荷瘤小鼠瘤块的抑制作用，表明白术各剂量组均可　ＴＮＦ—ａ和ＩＩ　．２是反映机体免疫功能的重要指　标，在肿瘤治疗中发挥着重要作用。ＴＮＦ—ａ是一种　主要由活化的单核一巨噬系统分泌的可溶性蛋白细　胞因子，具有调节免疫应答、促进细胞生长分化等多　种生物学功能，与机体炎症免疫反应有密切关系。　以抑制肿瘤生长。以中剂量组效果最佳，白术中、小　剂量组还可以提高Ｓ　荷瘤小鼠胸腺指数。胸腺为　体内重要免疫器官，是Ｔ淋巴细胞发育成熟的场　所，胸腺指数增加说明白术能促进胸腺细胞增殖分　化，促进细胞免疫功能。本实验中，白术各剂量组　药物均可提高荷瘤小鼠胸腺指数，其中自术中、小剂　７０　正常情况下体内浓度较低。适量的ＴＮＦ—ａ对机体　的保护反应是必需的，但过量的ＴＮＦ—ａ则对机体产　维普资讯 http://www.cqvip.com

２００６年１月　朱庆均等：白术水提物抑瘤作用及其机制研究　第３０卷第１期　生损伤反应。因此，ＴＮＦ—ａ的生物作用与体内的含　量密切相关。许多临床报道肿瘤患者的ＴＮＦ—ａ含　增殖分化，增强ＮＫ细胞、单核细胞杀伤活性，从而　抑制肿瘤增殖。白术对ＴＮＦ—ａ和ＩＬ一２分泌的调节　量不是下降而是升高，从而导致机体细胞因子调节　系统紊乱，同时过量的ＴＮＦ—ａ还可以产生脂肪降　解、血管渗透性增加、内源性致热、全身出血坏死等　作用呈现出一定的剂量效应关系。　我们的研究结果表明，中药白术具有抑制肿瘤　生长的作用可能与其调节免疫功能有关，尤其是细　胞免疫有关，并且这种作用呈现出一定的剂量效应　关系。本文为利用白术抗肿瘤提供了理论依据，但　其确切的抑瘤机制尚需从多角度进一步研究‘。　病理损伤性反应，这也是临床上肿瘤患者晚期出现　全身广泛衰竭的病理生理学机制之一＿４．５　Ｊ。ＩＬ一２主　要由活化的Ｔｈｌ细胞产生，是宿主抗肿瘤最重要的　细胞因子，在细胞因子网络的调节中起关键作　［参考文献］　¨］刘春安，彭明．抗癌中药大辞典［Ｍ］．武汉：湖北科学技术出版　社．１９９４：３４２．　用ｌ６ｊ，ＩＬ一２对肿瘤细胞无直接细胞毒作用，通过调　节机体的免疫系统发挥抗肿瘤效应。我们的研究表　明，白术各剂量组均可降低荷瘤小鼠血浆ＴＮＦ—ａ含　量，其中白术中剂量组作用显著。白术能够降低荷　瘤小鼠血清ＴＮＦ—ａ含量，可能是由于肿瘤被抑制，　机体免疫功能受到保护，感染机会减少有关，也可能　是由于瘤细胞在转移过程中激活循环系统内单核细　［２］壬翕，刘玉瑛。史天良。等．白术挥发油抗实体瘤的作用研究［Ｊ］．　中国药物与临床，２００２。（４）：２３９．　［３］凌虹，张风民。程志。等．黄芩等中药及其复方抗肿瘤作用研　究［Ｊ］．中医药学报，１９９８，（２）：４８．　［４］陈飞，侯芳玉．肿瘤坏死因子与ＳＩＤＳ［Ｊ］．国外医学－免疫学分　册，Ｉ９９２，（４）：Ｉ７９　胞的能力下降，同时肿瘤浸润细胞受肿瘤抗原刺激　减弱，导致ＴＮＦ—ａ含量减少。白术大、中剂量组可　以提高小鼠血浆ＩＬ一２含量，这可能是由白术促进小　鼠Ｔｈ１细胞活化，产生ＩＬ一２，进而促进Ｔ和Ｂ细胞　［５］张风蕴．炎性细胞因子［Ｊ］．国外医学・免疫学分册，１９９２，（５）：　２６１．　［６］Ｗａｌｄｍａｎｎ　Ｔ，Ｔａｇａｙａ　Ｙ，Ｂａｍｆｏｒｄ　Ｒ．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ一２，ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　ｌ５　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｅｅｐｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｒｅｖ　Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９８，（３）：２０５．　（上接第６８页）　表６对自然衰老模型大鼠红细胞ＳＯＤ活性、血浆ＣＡＴ活性及ＭＤＡ含量的影响（　±　）　与老年对照组比较＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１　３讨论　妙奥春颗粒由淫羊藿、何首乌、甘草等组成，全　方补肾健脾兼以调肝，阴阳并补，脾肾双益，补阳而　不燥，养阴而不腻，补泻兼施，寒温并用，共奏延衰益　寿之功。　粒内含有一定量的微量元素，主要参与ＳＯＤ、ＣＡＴ、　ＧＳＨ　ｐｘ等抗氧化酶的活性中心，抑制和清除活性　氧自由基始动因子的产生，对于早期预防疾病和延　缓衰老是有益的。实验结果表明，妙奥春颗粒能使　体内脏器抗氧化酶活性显著升高，使体内心肌、肝　脏、肾脏和脑中ＭＤＡ含量显著下降，从而抑制体内　脂质过氧化反应，使大鼠红细胞ＳＯＤ活性、血浆　ＣＡＴ活性升高，ＭＤＡ含量降低，具有较好的抗氧化　本研究用ＥＳＲ方法证明妙奥春颗粒内有效成　分确有抗氧化作用，可直接清除’ＯＨ和０２一，并具　有明显的量效关系，这为清除体内活性氧自由基作　为衰老效应的启动因子提供了实验依据。妙奥春颗　和延缓机体衰老作用。　７ｌ